未拆封的澳洲胎牛血清,一般情況下應存放于-10℃至-20℃,在產品規(guī)定的效期內均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內,再放回冷凍。
將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。完全溶解后建議盡快使用,若長時間儲存在2-8℃,胎牛血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。
總結:血清推薦在-10至-20℃條件儲存,并避免反復凍融。
血清中絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?澳洲胎牛血清在非冷凍狀態(tài)下存放時,其中的多種蛋白或脂蛋白會形成肉眼可見的沉淀。如血纖蛋白(fibrin),在解凍過程中可能會發(fā)生聚集,形成肉眼可見的沉淀,當遇到此類情況,我們可以如下應對:
1、將冷凍保存的胎牛血清取出后,置4℃冰箱靜止過夜;
2、待血清融化后,上下顛倒,輕輕混勻,繼續(xù)4℃2-3小時;
3、輕輕吸取上層血清,分裝,余底下50ml左右;
4、低速離心5分鐘,去掉沉淀。
如何避免澳洲胎牛血清中產生沉淀?
1、解凍時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一;
2、分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡);
3、切勿由-20℃直接至37℃水浴鍋解凍,較大的溫差,易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀;
4、切勿將胎牛血清置于37℃過長時間,否則可能使之渾濁,其中一些不穩(wěn)定的組分也會因此受到影響,從而降低血清的品質;
5、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟;
6、若必須做澳洲胎牛血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且保持搖晃均勻。溫度過高、時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。