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依科賽胎牛血清FSP500后的需立即確認胎牛血清有無異常,如血清有沒有出現(xiàn)融化情況、瓶口及瓶身有無出現(xiàn)碎裂、瓶口是否密封完整等情況。
血清融化方法:建議產(chǎn)品使用梯度溶解法,將血清從-20℃冰箱取出后,于2-8℃解凍過夜,并在此過程中不時輕輕搖動使之溶解均勻。那么,細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的黑點是污染嗎?
更換依科賽胎牛血清FSP500后發(fā)現(xiàn)細胞鏡下觀察有黑點,需要肉眼觀察細胞培養(yǎng)液有無混濁的情況出現(xiàn),其次鏡下觀察細胞中的黑點是否有游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
1、細胞生長過老,破碎的細胞殘??;
2、血清等級不足以維持良好的細胞生長;
3、配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長;
4、配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格;
5、培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
更換依科賽胎牛血清FSP500后細胞出現(xiàn)死亡?培養(yǎng)細胞的死亡原因有多種情況,常見的有以下幾種:
1、培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動過大;
2、細胞在凍存或復(fù)蘇過程中損傷;
3、培養(yǎng)液滲透壓不正確;
4、培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;
5、胰蛋白酶消化過度;
6、微生物污染;
7、細胞在傳代時未計數(shù)、計活率,可能導(dǎo)致細胞接種密度過低或過高不能正常鋪瓶生長。